激光扫描共焦显微镜的基本原理

2005/3/18/14:50    普通光学显微镜使用的卤素灯光源为混合光，光谱范围宽，成象时样品上每个照光点均会受到色差影响以及由照射光引起的散射和衍射的干扰，影响成象质量。

    LSCM结构上采用双针孔（Pinhole）装置，形成物象共轭的独特设计，激光经物镜焦平面上针孔形成点光源对样品扫描，于测量透镜焦平面的探测针孔处经空间滤波后，有效地抑制同焦平面上非测量光点形成的杂散荧光和样品不同焦平面发射来的干扰荧光。这是因为光学系统物象共轭，只有物镜焦平面上的点经针孔空间滤波才能形成光点图象，扫描后可得到信噪比极高的光学横断面，分辨率比普通光学显微镜提高1.4倍。

    LSCM的光源为激光，单色性好，基本消色差，成象聚焦后焦深小，纵向分辨率高，可无损伤地对样品作不同深度的层扫描和荧光强度测量，不同焦平面的光学切片经三维重建后能得到样品的三维立体结构，这种功能被形象的称为"显微CT"。